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【疑难解析】 1、核心操作基因表达载体构建的注意事项①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。 2、DNA复制与PCR技术的比较 PCR技术DNA复制 相同点原则碱基互不配对 原料四种脱氧核苷酸 条件模板、能量、酶 不同点解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化 场所体外复制细胞核内 酶热稳定的DNA聚合酶细胞核内的DNA聚合酶 结果大量的DNA片段整个DNA分子 3、①目的基因检测，利用DNA分子杂交技术，提取受体细胞中的DNA，然后高温解成单链，再与同位素标记的DNA探针杂交看是否有杂交带;②mRNA检测，利用RNA分子杂交技术，目的基因DNA一条链(作探针)与受体细胞中提取的mRNA杂交看是否有杂交带;③抗原-抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫，产生相应的抗体，并提取出而来的。 例题巩固：1、获得目的基因的方法有( ) A.构建基因文库从基因文库中获取B.人工合成C.PCR技术大量获得D.利用农杆菌转化法获得 2、在基因工程中，把选出的目的基因(共100个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是46个)放入DNA扩增仪中扩增2代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是( ) A.54个 B.162个 C.378个 D.756个 3、.哪项不是基因表达载体的组成部分( ) A.启动子 B.终止密码 C.标记基因 D.目的基因 4、在基因诊断技术中，所用的探针DNA分子中必须存在一定量的放射性同位素，后者的作用是( ) A.为形成杂交的DNA分子提供能量 B.引起探针DNA产生不定向的基因突变 C.作为探针DNA的示踪元素 D.增加探针DNA的分子量 5、下列关于基因工程的叙述，正确的是( ) A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B.细菌质粒是基因工程常用的运载体 C.通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA D.为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体 (责任编辑：admin) |