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【预习导学】 1、目的基因获取 (1)获取方法主要有两种： ①获得原核细胞的目的基因可采取 ，获取真核细胞的目的基因一般是 。 ②人工合成目的基因的常用方法有 和 。 (2)PCR扩增目的基因含义： 。 ①目的：获取大量的目的基因 ②原理： ③过程：第一步：加热至90～95℃ DNA解链为 ;第二步：冷却到55～60℃， 与两条单链DNA结合;第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行 的合成。特点： 数目以 形式扩增 2、 基因表达载体的构建 (1)重组DNA分子的组成：除了目的基因外，还必须有 、 、 。标记基因的的作用：鉴定 中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞 出来。 (2)构建方法：同种限制酶分别切割 和 ，再用 把两者连接。 3、转化：是目的基因进入受体细胞内，在受体细胞内维持 和 的过程。 (2)常用转化方法： ①将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 ，其次还有基因枪法和 。 ②将目的基因导入动物细胞：受体细胞一般选择 ，最常用的方法是 。 ③将目的基因导入微生物细胞：Ca2+处理法。首先将细胞用 处理，成为 。接下来将载体DNA分子与受体细胞在 中混合，完成转化过程。 4、 ①首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 技术。 ②其次还要检测目的基因是否转录出 ，方法是采用RNA分子杂交技术。 ③最后检测目的基因是否翻译成 ，方法是采用 杂交技术。 ④上述三步检测为分子水平的检测，还可以进行个体生物学水平的鉴定，如抗虫或抗病的鉴定等。 基因工程的意义：能够打破生物种属的界限，即 ，在分子水平上 改变生物的遗传特性。 (责任编辑：admin) |