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高中生物重要实验也是高中生物考查的重点，一些题目往往从生物课本中最基本的实验演变而来，高中生物复习提纲所以掌握这些重要实验就十分重要了。  实验一：观察DNA和RNA在细胞中的分布 1.实验原理：利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同：甲基绿+DNA→绿色 吡罗红+RNA→红色 2.分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中； 线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 3.实验结果：细胞核呈绿色，细胞质呈红色. 4.实验结论：DNA主要分布在细胞核中；RNA主要分布在细胞质中； 5.实验流程： (1)取口腔上皮细胞制片：①载玻片上滴一滴质量分数为：0.9%NaCl溶液； ②漱口后，用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴中涂抹几下；③载玻片在酒精灯上烘干，盖上； (2)水解：①载玻片放入盛有30ml质量分数为8%的HCl的小烧杯中；②大烧杯中加入30℃温水； ③将小烧杯放入大烧杯中保温5min； (3)冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s； (4)染色：①吸水纸吸去载玻片的水分；②滴两滴混合染液，染色5min；③吸去多余的染液，盖上盖玻片； (5)观察：先低倍后高倍； 6、几种液体在实验中的作用： (1)0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮的正常形态。 8%的HCl：①改变细胞膜等的通透性；②使染色质中的DNA与蛋白质分开。蒸馏水：配置染液；冲洗载玻片。 (2)混合染液需要现配现用； (3)该实验不宜用深色的材料，避免颜色对实验的干扰。 实验二：物质鉴定 一、实验原理：还原糖+斐林试剂～砖红色沉淀(水浴加热) 脂肪+苏丹III～橘黄色(滴液观察或制片显微镜观察) 脂肪+苏丹IV～红色 蛋白质+双缩脲试剂～紫色反应(不加热) 1、还原糖的检测 (1)材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如：苹果，梨，白萝卜。 (2)试剂：斐林试剂(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，现配现用。 (3)步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴 加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色) 实验三：观察叶绿体和细胞质流动 1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片 2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色，球形或椭球形。 用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色，细胞质接近无色。 知识概要：取材、制片、低倍观察、高倍观察 实验四：观察有丝分裂 1、材料：洋葱根尖(葱，蒜) 2、步骤：(一)洋葱根尖的培养 (二)装片的制作 3、实验原理： (1)龙胆紫溶液能将染色体染成深色 (2)有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同，可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于那个时期。 制作流程：解离→漂洗→染色→制片 1.解离：药液：质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精(1：1混合液).时间：3~5min.目的：使组织中的细胞相互分离开来. 2.漂洗：用清水漂洗约10min.目的：洗去药液，防止解离过度，并有利于染色. 3.染色：用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~5min 目的：使染色体着色，利于观察. 4.制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片.然后用拇指轻轻地按压载玻片. 目的：使细胞分散开来，有利于观察. (三)观察 1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。(长方形：伸长区) 2、换高倍镜下观察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。(注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点)。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。 实验五：色素的提取和分离 1、原理：(1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素(2)各色素在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素 2、步骤： 提取色素 (1)称取5g绿色叶片并剪碎提取色素 (2)加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮 (研钵→研磨→漏斗过滤→，收集到试管内并塞紧管口) 制滤纸条 (1)将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角(使层析液同时到达滤液细线) (2)在距剪角一端1cm处用铅笔画线 滤液划线 (1)用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线 (2)干燥后重复划2-3次 纸上层析 (1)向烧杯中倒入3ml层析液(以层析液不没及滤液细线为准) (2)将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中 (3)用培养皿盖盖上烧杯 观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带。 (责任编辑：admin) |