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2021年高考生物实验归纳:绿叶中色素的提取和分离


    下面是高中生物老师给大家带来高中生物实验——绿叶中色素的提取和分离的因素知识点归纳,2021年高考生必看!
    
    1.实验原理
    (1)提取:绿叶中的色素能够溶于有机溶剂而不溶于水,可用无水乙醇等有机溶剂提取色素。
    (2)分离:各种色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢,从而使各种色素相互分离。
    2.实验步骤
    提取色素:称取5g的绿叶,剪碎,放入研钵中→加入少量SiO2、CaCO3和10mL无水乙醇
    ↓→研磨→过滤→将滤液收集到试管内并塞严试管口
    制备滤纸条:将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长和直径的滤纸条,将滤纸条一端剪去两角,
    ↓在距离剪角一端1cm处用铅笔画一条细的横线
    画滤液细线:用毛细吸管吸取少量的滤液,沿铅笔线均匀地画出一条细线,待滤液干后,
    ↓再画一两次
    分离色素:将适量的层析液倒入试管中,将滤纸条轻轻插入层析液中→
    ↓用棉塞塞紧试管口,装置如图所示
    观察结果:滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同的色素带
    
    [深度思考]
    (1)为什么需要选用新鲜绿色的叶片做实验材料?
    提示新鲜绿色的叶片中色素含量高,从而使滤液中色素含量较高,实验效果明显。
    (2)为什么研磨时要迅速?为什么研磨时要加入少量的CaCO3和SiO2?
    提示叶绿素不稳定,易被破坏,因此研磨要迅速、充分,以保证提取较多的色素。二氧化硅破坏细胞结构,使研磨充分。碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。
    (3)为什么盛放滤液的试管管口加棉塞?
    提示防止乙醇挥发和色素氧化。
    (4)滤纸为什么需预先干燥处理?在制备滤纸条时,为什么将一端的两个角剪掉?
    提示干燥处理的目的是使层析液在滤纸上快速扩散;剪掉两角的目的是防止层析液沿滤纸边缘扩散过快,从而保证色素带分离整齐。
    (5)为什么画滤液细线要直、细、匀,而且待滤液细线干燥后再重复画一两次?
    提示画滤液细线要直、细、匀的目的是使分离出的色素带平整不重叠;滤液细线干燥后再重复画一两次,使分离出的色素带清晰分明。
    (6)在层析时,为什么不能让滤液细线触及层析液?
    提示滤纸条上的滤液细线触及层析液,会使色素直接溶解到层析液中,结果使滤纸条上得不到色素带。
    (7)分析滤纸条上色素带宽窄不同的原因。
    提示不同种类的色素在绿叶中的含量不同,含量多的色素带宽,反之色素带窄。
    (8)如图是实验得到的色素在滤纸条上的分布图示,分析比较各种色素的含量及其在层析液中的溶解度的大小。
    
    提示①色素含量:叶绿素a>叶绿素b>叶黄素>胡萝卜素。
    ②溶解度大小:胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a>叶绿素b。
    [归纳整合]
    1.绿叶中色素提取和分离实验异常现象分析
    (1)收集到的滤液绿色过浅的原因分析
    ①未加石英砂(二氧化硅),研磨不充分。
    ②使用放置数天的叶片,滤液色素(叶绿素)太少。
    ③一次加入大量的无水乙醇(正确做法:分次加入少量无水乙醇提取色素)。
    ④未加碳酸钙或加入过少,色素分子被破坏。
    (2)滤纸条色素带重叠:滤纸条上的滤液细线接触到层析液。
    (3)滤纸条看不见色素带
    ①忘记画滤液细线或没有提取出色素。
    ②滤液细线接触到层析液,且时间较长,色素全部溶解到层析液中。
    2.实验设计的四大基本原则
    (1)单一变量原则:即除自变量(实验变量)以外,应使实验组与对照组的无关变量保持相同且适宜。如生物材料相同(大小、生理状况、年龄、性别等)、实验器具相同(型号、洁净程度等)、实验试剂相同(用量、浓度、使用方法等)和条件相同(保温或冷却、光照或黑暗、搅拌、振荡等)。
    (2)对照原则:应设置对照实验,使实验组与对照组的自变量不同(其余因素都相同),以便减小实验误差。
    (3)平行重复原则:在实验设计中为了避免实验结果的偶然性,必须对所做实验进行足够次数的重复,以获得多次实验结果的平均值,保证实验结果的准确性。
    (4)科学性原则:指在设计实验时必须有充分的科学依据,即实验目的要明确,实验原理要正确,实验研究的材料和实验方法的选择要恰当,整个实验设计的思路和实验方法的确定都不能偏离实验原理、有关的生物学知识及其他学科领域的基本知识。
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